图形摘要
信用:DOI: 10
1016/j
isci
2021
103227 基因表达是一个高度受调控的序列，有许多参与者，其中之一是雌激素受体-α (ER)，它通过对内分泌系统产生的激素做出反应来推动这一过程
当某种物质破坏了与受体结合的激素，如环境化合物或污染物，称为内分泌干扰化学物质(EDCs)，其结果可能是有害的，在某些情况下，会导致某些形式的癌症
但是，某些化合物究竟是如何干扰这一过程的，并不总是容易解读的
贝勒医学院和德克萨斯A& M大学的研究人员进一步优化了一种模型细胞系，该细胞系被设计成便于对er刺激的t转移的多个机制步骤进行图像分析，并开发了一种新的活细胞定量分析ER动态的方法，该方法使用暴露于EDCs后的光漂白后荧光恢复(FRAP)
这些发现在当前版本的《国际科学》中有所描述
“在过去的研究中，我们只使用了少量已知的化合物来严格观察流动性——当暴露于激素时，受体是否在移动，因为这种检测很慢，”博士说
迈克尔·曼奇尼，贝勒大学分子和细胞生物学教授，德克萨斯A&M健康科学中心生物科学和技术研究所(IBT)兼职教员
如前所述，该方法能够将雌激素受体迁移率的变化与已知的激活或失活激素联系起来
“在目前的工作中，我们现在看到了更多的细节——例如，细胞中有多少受体，以及它是否参与了可见的多拷贝报告基因位点——现在这足够快，有助于测试更大组的已知激素和内分泌干扰物
" 环境保护局提供了一组已知靶向ER的45种化合物，并得到了NIEHS支持的得克萨斯州A&M超级基金研究中心(P42ES027704)的部分支持，研究人员开始使用一种新的、更敏感的细胞模型和FRAP来更仔细地研究受体迁移与转录的关系
“例如，我们能够看到哪些化合物导致受体靶向转录位点，以及它们是否抑制或激活了来自该位点的转录，”Dr
德克萨斯A&M大学的助理研究科学家迈克尔·博尔特
“一个有趣的观察结果是，虽然一些化合物激活了雌激素受体，但激活量会趋于平稳
尽管转录激活水平相同，但一些化合物导致受体移动缓慢，而另一些则移动迅速
我们目前还不清楚为什么，或者在一连串的步骤中，这可能会产生影响
" 虽然这些观察对于理解环境因素如何影响雌激素受体很重要，但这项研究的目标是创建和微调一个过程，以有效地测试更多的化合物
这使得新细胞系的使用与经过验证的高含量分析方法结合在一起，并且还与FRAP结合使用新开发的算法来大大加快大量细胞的处理和分析
“大多数FRAP方法一次只能在显微镜视野中测试有限数量的细胞
因此，如果你想测试大量细胞以获得更好的统计数据，那将需要许多不同的成像运行，”曼奇尼说
“现在，在雇用贝勒和IBT实验室成员的CPRIT核心资源资助的信息学支持下，我们有了一种比较实时图像系列的新方法，使用图像数学一次找到并分析多个漂白区域，使过程更加高效
分布式资源调度程序（Distributed Resource Scheduler的缩写）
开发新分析管道的博尔特和潘卡伊·辛格把这个过程戏称为“框架分析”
" 曼奇尼说，由于速度和准确性的提高，这些强有力的检测发展正在打开环境检测的领域
“我们已经创建了一组细胞系，这些细胞系具有绿色荧光蛋白标记的雌激素(和其他)受体以及细胞核中可见的转录位点
没有配体，核ER信号看起来像一片光滑的玻璃海洋
然而，如果你添加一种化合物，我们可以在几分钟内看到一个斑点，告诉你转录位点的受体发生了什么
一种化合物是否改变报道基因位点的大小与它如何影响转录有关
总的来说，我们继续比以前更详细地观察和量化这个过程，”曼奇尼说
博尔特说，他们可以在不到一个小时的时间内获得某些结果和信息，正在处理的数据量比以前大得多
他说:“我们现在看到的是，与不同类别化合物结合的ERα的动力学比我们想象的要复杂得多。”
来源：由phyica.com整理转载自PH，转载请保留出处和链接！
