Credit: Pixabay/CC0公共领域 美国国立卫生研究院(NIH)的科学家开发了一种新的样本制备方法来检测SARS-Cov-2,这是导致新冠肺炎的病毒
该方法绕过了提取病毒的遗传核糖核酸材料,简化了样品纯化,并有可能减少测试时间和成本
该方法是国家眼科研究所(NEI)、国家卫生研究院临床中心(CC)和国家牙科和颅面研究所(NIDCR)研究人员合作的结果
诊断检测仍然是抗击新冠肺炎大流行的重要工具
检测新型冠状病毒病毒的标准测试包括使用一种叫做定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)的技术将病毒RNA扩增到可检测的水平
但是首先,必须从样本中提取核糖核酸
核糖核酸提取试剂盒的制造商在新冠肺炎大流行期间难以跟上需求,阻碍了全球范围内的检测能力
随着新病毒变种的出现,比以往任何时候都更需要更好、更快的测试
罗伯特·B领导的团队
胡夫纳格尔,男
D
博士
D
NEI医学遗传学和眼基因组学组组长,管斌博士
D
NEI眼科基因组实验室的研究员使用实验室供应公司Bio-Rad生产的螯合剂Chelex 100树脂保存样本中的新型冠状病毒RNA,用于RT-qPCR检测
“我们使用了不同病毒体浓度的鼻咽和唾液样本,以评估它们是否可以用于直接RNA检测,”关说,该技术报告的主要作者,该报告于本周发表在《国际科学》杂志上
“答案是肯定的,而且非常敏感
此外,这种制剂可以灭活病毒,使实验室人员处理阳性样本更加安全
" Hufnagel的团队通过使用合成样本和人类样本测试多种化学物质来鉴定那些能够以最小的降解保留样本中的核糖核酸,同时允许通过RT-qPCR直接检测病毒的化学物质,从而获得了他们的发现
为了验证该测试,荷兰国际发展研究中心的布雷克·M
华纳,D
D
S
博士
D
,M
P
H
,和他的团队收集了患者样本(根据研究方案NIH IRB 20-D-0094),并将其储存在病毒运输介质中,或者储存在NIH症状检测机构新开发的螯合树脂缓冲液中
病毒运输介质中的样本由美国国立卫生研究院临床中心的新冠肺炎检测小组检测,该小组由卡伦·M领导
弗兰克,M
D
博士
D
,使用常规的核糖核酸提取和逆转录聚合酶链反应检测
加热螯合树脂缓冲液中的样品,然后用逆转录聚合酶链反应检测病毒核糖核酸
与标准方法相比,新制剂显著增加了可用于测试的RNA产量
Hufnagel说:“我们认为这种新的方法有明显的好处,可以提高检测的灵敏度,节省成本和时间,这种方法可以在室温下稳定RNA,便于在临床环境中运输、储存和处理
"
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