作者:Forschungsverbund Berlin
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(FVB) 新鲜分离的非洲狮卵母细胞
荣誉:詹妮弗·扎梅尔/莱布尼茨-IZW 来自德国莱布尼茨动物园和野生动物研究所(莱布尼茨-IZW)、丹麦吉夫斯库德动物园和意大利米兰大学的一组科学家成功地在未成熟卵母细胞玻璃化后生产了第一只非洲狮子蛋白-透明颤蚓
对于这种特殊的冷冻保存方法，卵母细胞是在动物阉割或死亡后直接收集的，并立即在-196℃的液氮中冷冻
这项技术可以无限期地保存珍贵动物的卵母细胞，这样它们就可以在辅助生殖技术的帮助下生产后代
目的是进一步改进和应用这些方法来拯救高度濒危物种，如亚洲狮子免于灭绝
目前关于非洲狮子作为模式物种的研究是朝着这个方向迈出的重要一步
该结果发表在科学杂志《低温生物学》上
狮子卵母细胞被认为对冷冻非常敏感，因为它们的脂质含量高，导致缓慢冷却后的复苏不佳
玻璃化可以避免这个问题，因为细胞在含有高浓度防冻剂的溶液中以超高速冷冻
这种方法可以防止细胞中冰晶的形成，而冰晶的形成会破坏细胞，并使细胞在无限长的时间内保持完整，以便以后使用
在目前的研究中，科学家们从吉夫斯库德动物园的四只非洲雌狮身上收集卵母细胞，这些雌狮是为了管理种群而被安乐死的
一半的卵母细胞(60)立即玻璃化
在液氮中储存6天后，将玻璃化的卵母细胞解冻，并在39℃的培养箱中进行共32-34小时的体外玻璃化
另一半(59)作为对照组，不经玻璃化步骤直接进行玻璃化
然后两组的成熟卵母细胞与来自非洲狮雄性的冷冻-解冻精子受精
“我们可以证明玻璃化冷冻卵母细胞组中存活和成熟的卵母细胞比例很高
莱布尼茨-IZW大学生殖生物学系的科学家詹尼弗·扎梅尔说:“几乎有50 %的老鼠已经成熟，比例与对照组相似。”
玻璃化组有7个早期胚胎发育，而对照组只有3个胚胎发育
“据我们所知，这是第一次将非洲狮或其他野生猫科动物的卵母细胞玻璃化后生产出透明胚胎，”米兰大学的马蒂娜·科伦坡说，她是莱布尼茨-IZW大学的客座科学家
在最近与米兰大学和维也纳兽医大学的同事合作进行的一项关于家猫的科学研究中，莱布尼茨-IZW大学的繁殖生物学小组证明，立即对猫科动物卵母细胞进行现场玻璃化冷冻是获得大量优质配子从而获得更多发育胚胎的最佳选择
这项研究也发表在《低温生物学》上
如果样品是从动物园里的野生动物身上采集的，然后需要运送到合适的实验室，现场玻璃化就特别有用
“新鲜卵母细胞和卵巢组织的跨国运输通常是复杂的，并且在时间上是关键的，而卵母细胞的现场玻璃化允许运输的安全时间段
这些卵母细胞可以在以后受精，一旦它们被运送到一个合适的实验室，并且有了男性的精子，”扎梅尔解释说
目前的研究表明，非洲狮子卵母细胞的玻璃化冷冻、玻璃化冷冻和受精是成功的遗传资源库
然而，玻璃化卵母细胞的早期胚胎没有一个发育超过4细胞期
澄清受玻璃化影响的途径对于更好地理解玻璃化卵母细胞在解冻后的特殊需要是很重要的
莱布尼茨-IZW大学生殖生物学系主任卡塔琳娜·朱吉诺说:“虽然胚胎发育仍然受到损害，但我们的结果给了人们希望，即猫科动物的卵母细胞将来可以冷冻保存并储存在生物库中。”
朱热诺补充道:“我们的目标是在家猫和非洲狮等模式物种中进一步改进这些方法，以便有朝一日将它们用于亚洲狮等濒危猫科动物的辅助繁殖。”
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