物理科技生物学-PHYICA

使用单残基标记标签照亮黄色特级大片活细胞中的微小蛋白质

化学 2022-05-04 00:02:06

卡罗林斯卡学院 用于荧光活细胞成像的通用单残基末端标记

信用:西蒙·埃尔泽塞尔 卡罗林斯卡研究所的生命实验室研究员西蒙·艾尔斯瑟实验室报道了一种方法,该方法允许通过在感兴趣的(微量)蛋白质的两端添加一个小扰动(一个单一的氨基酸)来对蛋白质进行荧光标记

这种方法被称为单残基末端标记法

30年前,绿色荧光蛋白绿色荧光蛋白的克隆,加上基因工程工具,使研究人员能够将荧光“信标”融合到任何感兴趣的蛋白质上,从而可以使用荧光显微镜在活细胞中直接观察到它,从而彻底改变了这一领域

今天的显微镜实现了纳米分辨率、多色的实时成像,使研究人员甚至可以分辨最小的亚细胞结构

然而,荧光蛋白有一个限制:荧光标签的大小通常相当于一个典型折叠蛋白的大小,因此给研究中的蛋白增加了相当多的分子“货物”,并可能影响其功能

这可能成为微蛋白研究的一个特殊障碍,微蛋白是一类新发现的比平均水平小得多的蛋白质

卡罗林斯卡学院科学生命实验室西蒙·艾尔斯瑟实验室的博士后研究员洛伦佐·拉弗兰奇领导的一项研究报告了一种方法,这种方法允许在感兴趣的(微量)蛋白质的两端基因添加一个小扰动——一个单一的氨基酸——来对蛋白质进行荧光标记

这种方法被称为单残基末端标记法

它是基于一个合成的构建模块(一个非标准的“设计者”氨基酸,而不是21个标准氨基酸中的一个),它与一个更大的标签一起使用一种叫做遗传密码扩展的技术结合在一起

然后标签被细胞迅速移除,在感兴趣的蛋白质上留下一个末端设计氨基酸

设计的氨基酸在蛋白质中引入了一个化学基团,随后可以与一种小的有机荧光染料结合,点亮活细胞内感兴趣的蛋白质

现有标记技术的优势在于依靠遗传密码的扩展,STELLA可用于标记任何蛋白质的末端

发表在《美国化学学会杂志》上的这项研究证明了STELLA在荧光标记多种人类蛋白质和微蛋白方面的效用,这些蛋白质和微蛋白定位于不同的亚细胞区室和细胞器

除了细胞蛋白质,该团队还能够标记和定位由引起新冠肺炎的SARS-CoV2冠状病毒产生的许多难以捉摸的多肽

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