中国科学院李源
学分:Angewandte Chemie (2022)
多伊:10
1002/安歌
202117849 O-连接的β-N-乙酰氨基葡萄糖(O-glcn酰化)是一种重要的蛋白质翻译后修饰(PTM ),参与多种生物学功能
O-GlcNAc的可逆修饰在生物过程中赋予蛋白质开-关功能
随着一些肿瘤的侵袭和转移，O-糖基化异常与许多代谢性疾病密切相关
最近，一个由教授领导的研究小组
叶和教授
中国科学院大连化学物理研究所(DICP)的秦与
中国科学院上海药物研究所的黄伟发展了一种新的可逆化学酶标记O-GlcNAc糖肽的策略，使得对蛋白质O-GL cnac化的深入分析成为可能
他们的研究结果发表在3月25日的《化学杂志》上
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为了能够对O-糖基化进行全蛋白质组分析，从复杂样品的消化物中选择性富集糖肽是必要的
许多研究人员在通过液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)进行分析之前，已经寻求O-GLcn酰化肽的富集
然而，大多数方法都存在结合亲和力弱或标签体积大的问题，这会干扰O-GLcn酰化肽的富集和鉴定
在这种新开发的策略中，使用Endo-M突变体将O-GlcNAc部分与长N-聚糖连接，这使得能够通过亲水相互作用液相色谱(hilic)富集标记的糖肽
然后，通过野生型Endo-M/S去除富集的糖肽上连接的聚糖，以恢复O-GlcNAc部分
与经典的化学酶标记法相比，该方法实现了无标记鉴定，消除了糖肽检测中庞大标记物的干扰
此外，通过使用这种方法，研究人员仅从0
4 mg的HeLa细胞核蛋白，这仅需要用于可比的only酰化分析的蛋白样品的1/10，表明该方法的高灵敏度
总的来说，他们从仅仅1，414个糖基中鉴定出1，414个
1 mg蛋白质样品，其中45%在过去35年的所有人类样品的O-GlcNAcAltas中没有被包括，这增加了蛋白质O-GlcNAcylation的分析覆盖范围
“这种无标签的富集策略为O-GLC酰基化的全蛋白质组分析提供了一种独特的途径，并促进了机制研究，”教授说
你
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