Fig
1:捕获的PARP1相互作用蛋白的鉴定
a .示意图，描述了通过与质谱相关联的雾凇或邻近标记来识别捕获的PARP1蛋白质–蛋白质相互作用体
将细胞暴露于PARPi + MMS(使能捕获)或MMS(不捕获)1小时，之后通过质谱分析鉴定PARP1相互作用/近端蛋白质
生物素酚
b、克隆形成试验，说明补充的par P1 –/–CAL51细胞中PARPi敏感性的恢复，如a中所述
不同克隆中PARP1蛋白的表达见扩展数据图
1a
c、对b中所示的菌落形成测定进行定量；数据是两次生物复制的平均值
d，PARP1WT–apex 2–eGFP蛋白定位于DNA损伤位点，产生PAR并可被PARPi捕获
表达PARP1WT–apex 2–eGFP的细胞用PAR传感器转染，PAR传感器是融合到mRuby2的PBZ PAR结合结构域(左)
PARP1WT–apex 2–eGFP和PBZ–mrub 2在紫外线微照射部位积累
暴露于100牛米的他拉唑帕利会导致PARP1WT–Apex 2–eGFP的持续积累(中间)，但会消除PAR的产生(右)
数据代表两个结果相似的独立实验
二甲基亚砜
在PARP1捕集条件下富集的e、f、PARP1相互作用(由PSM比率((talazoparib + MMS) ÷ MMS)和MS分数定义)
散点图显示的是PARP1WT–eGFP(e)和PARP1del
p
119 K120 s–EGFp(f)雾凇
g，PARP1相互作用在par P1-捕集条件下富集，用于par p1wt–Apex 2–eGFP邻近标记
在三个独立的实验中进行了雾凇和邻近标记
h，绘制了PARP1WT–apex 2–eGFP邻近标记相互作用的PSM与MS评分的关系图，显示p97是PARP1WT–apex 2–eGFP邻近标记中鉴定的最丰富的蛋白质之一
信用:DOI: 10
1038/s 14556-021-00807-6 科学家揭示了癌症如何抵抗PARP抑制剂，这是一种用于治疗全球数千名患者的精准药物
他们的研究发现，一些癌细胞可以通过去除困在它们DNA上的PARP蛋白来躲避PARP抑制剂的影响
研究人员认为，现有的药物——包括一种用于治疗酒精成瘾的药物——有可能通过阻止癌细胞清除PARP而使PARP抑制剂更有效
未来，这些发现也有助于预测哪些患者更有可能对PARP抑制剂产生反应
这项研究由伦敦癌症研究所的科学家领导，发表在《自然细胞生物学》上，由英国癌症研究资助，并得到了“乳腺癌现在”的额外支持
PARP抑制剂 PARP抑制剂包括olaparib和rucaparib，用于治疗一些卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌和胰腺癌患者——通常是遗传了有缺陷的BRCA1或BRCA2基因的患者
迄今为止，全球已有超过30，000名患者接受了奥拉帕利治疗
PARP抑制剂的目标是PARP1，这是一种DNA修复工具——使其失去活性，并将其锁定在DNA上
这不仅会阻止DNA修复，而且将PARP1捕获到DNA上最终会导致癌细胞死亡
但是PARP抑制剂并不适用于所有人，据估计，超过40%的BRCA1或BRCA2基因有缺陷的患者对它们没有反应
为了更好地理解这一点，ICR癌症研究所的克里斯·洛德教授和他的团队使用细胞系和蛋白质分析技术来发现癌细胞是如何产生耐药性的
p97的作用 他们寻找仅在PARP1被捕获时才附着在其上的蛋白质，这可能在将它从DNA中分离出来时起作用
研究小组发现，一种叫做p97的小分子可以在从DNA中提取PARP1，拯救癌细胞免于毁灭方面发挥关键作用
研究人员想知道如果最后一个阶段被阻断会发生什么
他们使用了人类的“器官样细胞”，一种由三阴性乳腺癌患者的组织和BRCA1突变构建的微型肿瘤；可能有资格接受PARP抑制剂治疗的人
阻断p97使癌细胞更容易受到PARP抑制剂talazoparib的影响，这表明了一条解决治疗耐药性的潜在途径
例如，1nM剂量的他拉唑帕利杀死了约30%的癌性器官，但当与p97抑制剂双硫仑联用时，这一比例高达90%
这一发现表明，通常用于治疗酒精成瘾患者的药物双硫仑可以与PARP抑制剂联合使用，以提高成功治疗的机会
对于洛德教授和他的团队来说，下一个挑战是将他们对PARP抑制剂耐药性的新认识转化为一种方法，以预测哪些患者应该接受PA RP抑制剂治疗，以及谁最好接受不同的癌症治疗
定制疗法 伦敦癌症研究所癌症基因组学教授克里斯·洛德教授说: “PARP抑制剂是当今癌症治疗中最令人兴奋的精确医学类别之一，但我们现在才更全面地了解为什么它们在某些患者中有效，而在其他患者中无效
“现在我们已经发现p97在控制PARP抑制剂耐药性中的作用，我们可以在未来提供治疗，挽救更多的生命
“我们相信我们的发现将有助于我们预测哪些患者应该接受PARP抑制剂，哪些患者可能需要将PARP抑制剂与其他药物联合使用才能获得成功治疗的最佳机会，或者哪些患者完全接受不同的治疗可能会更好
" 理解阻力背后的机制 英国癌症研究的首席执行官米歇尔·米切尔说:“我们的科学家在25年前帮助发现了BRCA基因
现在我们有了针对这种突变的药物，已经挽救了许多生命
“但我们知道，即使是最好的治疗方法，癌症也很快会被战胜
了解耐药性背后的机制很重要，这样我们就可以让我们已经拥有的药物更好地为更多的人服务
“使用已经可用的新药物组合是领先癌症一步的聪明方法，我们需要更多的研究来了解这种方法对PARP抑制剂的有效性
但是这项研究的发现是一个有希望的新方法，通过提供对他们最有效的治疗来增加对病人有利的几率
" “我们希望这项研究将带来新的治疗选择” 博士；医生
“乳腺癌现在”的研究、支持和影响主任西蒙·文森特说，“遗传了改变基因的人患乳腺癌的风险更高，每年英国都有数千人被诊断患有乳腺癌1或2基因
“PARP抑制剂药物对BRCA基因改变的癌细胞效果很好，然而，它们并不适用于所有人，一些癌症对这种靶向治疗产生了耐药性，这使得我们继续资助了解耐药性的研究变得非常重要
令人兴奋的是，这项研究表明，目前用于治疗酒精成瘾的药物可以与PARP抑制剂联合使用，使BRCA基因改变引起的乳腺癌的治疗更加有效
我们希望这项研究将带来新的治疗选择和更好的方法来为每个患者量身定制治疗，这样每个人都可以接受对他们最有效的治疗
“这一突破证明了世界级研究人员的不懈努力——包括许多乳腺癌Now资助的英国研究人员——他们在过去20年中帮助开发了PARP抑制剂药物，并为这一充满希望的发现奠定了基础
"
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